阴性对照Ct低（可能伴随稀释曲线R2 < 0.99），可能原因是：
 
污染：规范操作；
  清洁实验台、移液器、离心机等；
  用新耗材和新试剂；
  使用UNG和dUTP
 
非特异性扩增：
  提高退火/延伸温度（55-60 -> 63-70）
  降低Mg2+浓度