阴性对照Ct低(可能伴随稀释曲线R2 < 0.99),可能原因是:
 
污染:规范操作;
  清洁实验台、移液器、离心机等;
  用新耗材和新试剂;
  使用UNG和dUTP
 
非特异性扩增:
  提高退火/延伸温度(55-60 -> 63-70)
  降低Mg2+浓度